培養(yǎng)基除菌過濾裝置是在生命科學(xué)實驗室中被廣泛使用的一款基礎(chǔ)設(shè)備。其主要作用是對配置的培養(yǎng)基進(jìn)行除菌和除雜質(zhì)的過濾,以便后續(xù)用于細(xì)胞培養(yǎng)。下面我們以Sciencetool圣斯特品牌一款R300-500型號為例,來說明該儀器的結(jié)構(gòu)組成、工作原理和具體使用方法。
培養(yǎng)基除菌過濾裝置R300-500構(gòu)造和組件主要包括以下部分:1臺產(chǎn)生負(fù)壓吸力的無油真空抽濾泵;1組帶有真空表的真空調(diào)節(jié)閥,可以用觀察過濾系統(tǒng)內(nèi)的工作狀態(tài),并根據(jù)實際需要調(diào)節(jié)吸力和過濾速度;內(nèi)置阻塵濾芯的緩沖杯,可以阻擋倒吸的液體和異物直接抽入真空泵內(nèi),防止進(jìn)水和異物造成的意外損壞;1組瓶頂式的真空過濾瓶,該過濾瓶由濾杯、過濾連接座和藍(lán)蓋試劑瓶組成,濾杯盛放待過濾的培養(yǎng)基,濾膜鋪放在過濾連接座上方的濾膜支撐片上,連接座下部的GL45螺紋可以和藍(lán)蓋試劑瓶連接;另有一個帶有防倒吸進(jìn)液阻水保護(hù)器的泵管用于連接過濾瓶和抽濾泵。
具體的過濾原理如下:在過濾前,用戶將過濾膜裝入濾瓶組內(nèi),并進(jìn)行高溫高壓濕熱滅菌(一般建議121度30分鐘)。隨后在生物安全柜或者超凈工作臺內(nèi)取出瓶組。液體倒入過濾杯后打開抽濾泵。抽濾泵將藍(lán)蓋試劑瓶內(nèi)空氣抽走,使得濾器內(nèi)外形成壓力差,外部大氣壓便可推動培養(yǎng)基通過濾膜。細(xì)菌、微生物、雜質(zhì)等需要被去除的物質(zhì)被截留在濾膜的表面,從而達(dá)到過濾效果。通過濾膜的培養(yǎng)基流入試劑瓶內(nèi)被保存。
具體的使用方法主要有以下這些步驟:
1.根據(jù)實驗要求預(yù)先清洗好過濾瓶,如有滅菌要求,除抽濾泵外,過濾瓶組和泵管套件,都可以進(jìn)行121高溫高壓滅菌30分鐘。滅菌時請將過濾膜預(yù)先裝好在過濾漏斗內(nèi)。
2.根據(jù)圖示,將濾膜平整的鋪放在黑色濾膜支撐片上,本型號需要使用直徑φ47或50mm的濾膜(材質(zhì)不限,孔徑不限);濾膜鋪好后,將濾杯輕輕放在濾膜表面,并順時針旋轉(zhuǎn)卡緊濾杯。
3.滅菌后務(wù)必烘干,烘干溫度不要超過60度,且烘干時間建議在30分鐘內(nèi),烘干后后盡快拿出,不要長時間保存在烘箱內(nèi),會造成塑料件變形。
4.將試劑瓶放置在水平臺面上。
5.將過濾連接座擰在試劑瓶螺紋口上,感覺有阻力即可,不要擰死容易造成螺紋的滑絲
6.使用帶阻水保護(hù)器的泵管連接抽濾泵和過濾瓶組,阻水保護(hù)器一側(cè)印有“此面朝泵",請按照文字示意將該面朝向抽濾泵。
7.將濾液倒入濾杯內(nèi),準(zhǔn)備開始過濾。
接通電源,打開真空泵上面的電源開關(guān),真空泵啟動。
8.過濾過程中,可通過真空調(diào)節(jié)閥來調(diào)節(jié)吸力和抽濾速度,調(diào)節(jié)閥左右旋轉(zhuǎn)即可。
9.工作結(jié)束后,先使用調(diào)節(jié)閥泄壓,然后再關(guān)機(jī),這樣可以避免氣壓拍打濾液表面濺入泵管內(nèi)。
10.當(dāng)感覺設(shè)備缺乏吸力、抽濾速度過慢、無法抽吸,或有時可以吸有時又無法吸時(這是由于倒吸的液體可能在環(huán)境因素影響下蒸發(fā)掉一部分),一般是濾器被倒吸的液體堵塞,需要及時更換。此時可以先判斷是否是過濾堵塞,如果連接過濾瓶時,或者拔掉真空泵的泵管用手堵住泵管接口,真空泵仍有壓力(指針不低于600mmHg),表示主機(jī)正常工作,為阻水保護(hù)器堵塞,需要及時更換。